Дифференциальный диагноз

В табл. 1 перечислены основные дифференциальные диагнозы экссудативного перитонита и указаны способы дифференциации. Особенно трудно дифференцировать экссудативную форму перитонита от воспалительного лимфоцитарного холангита. Оба заболевания могут протекать с похожими симптомами: потерей веса, анорексией и асцитами. Характер асцитной жидкости одинаковый в обоих случаях (см. рис. 9.4), изменения биохимических свойств сыворотки и гематологических свойств также сходны, хотя у кошек с инфекционным перитонитом больше вероятность развития нерегенеративной анемии. Другие симптомы могут помочь дифференцировать эти заболевания, например, увеиты или плевральный выпот при инфекционном перитоните. Кошки с лимфоцитарным холангитом, как правило, более активны, чем кошки с перитонитом, и иногда отмечается полифагия. При невозможности дифференциации по клиническим признакам может потребоваться биопсия печени.

Диагностика
Вопреки многим утверждениям, простых методов диагностики инфекционного перитонита у живого животного, кроме биопсии и гистологии пораженных тканей, не существует. Многие имеющиеся тест-системы выявляют заражение коронавирусом, и обратная ЦПР определяет коронавирус кошек (см. далее). Ни одним методом нельзя отличить вирулентный штамм коронавируса от авирулентного, хотя некоторые методы позволяют дифференцировать изоляты, полученные в лаборатории. В большинстве случаев диагноз «инфекционный перитонит кошек» (любой формы), поставленный на основании клинических признаков и анамнеза, требует дополнительного исследования несколькими диагностическими методами, по результатам которых, соответствующим друг другу, можно предположить это заболевание. Эти методы включают:
· Клиническую патологию для диагностики поражения органов
· Анализ выпота брюшной или грудной полости
· Серологические тесты для выявления заражения вирусом
· Обратную ЦПР для определения вируса

· Гистопатологическое исследование пораженных тканей; это единственный метод, позволяющий поставить окончательный диагноз инфекционного перитонита.
В табл. 3 перечислены разные методы и примеры их использования. В табл. 4 представлены все методы, доступные на данный момент для определения коронавируса и антител к нему, и перечислены клинические ситуации, в которых применяются эти тесты.

Клиническая патология
Изменения биохимии сыворотки зависят от поражения органов и длительности заболевания. Гиперглобулинемия (иногда моноклональная гаммопатия) и увеличенная концентрация α1-кислого гликопротеина отмечаются постоянно (см. ниже). Неспецифические изменения в составе крови могут включать нейтрофилию (часто со сдвигом влево), лимфопению и нерегенеративную анемию. Подобные изменения более характерны для сухого перитонита. Возможны коагулопатии.

Природа перитонеальной жидкости
Анализ жидкости позволяет выявить изменения, характерные для инфекционного перитонита, или исключить его. Выпот при инфекционном перитоните обычно характеризуется следующими свойствами:
· Обычно соломенного цвета и всегда стерильный
· Высокое содержание белка (более 35 г/л), пенится при встряхивании, при стоянии в течение нескольких часов при комнатной температуре могут образовываться сгустки
· При соотношении альбумины/глобулины менее 0,4, вероятность того, что это инфекционный перитонит, высокая; более 0,8 это маловероятно; при значении между 0,4 и 0,8 это возможно, но неопределенно
· Концентрация α1-кислого гликопротеина более 1500 мг/мл (Дути и др., 1997) характерна для инфекционного перитонита
· Общее количество ядерных клеток менее 5000 клеток/мл (в основном нейтрофилы и макрофаги)
· При исследовании методом обратной ЦПР реакция положительная (см. далее)

Серологические методы
Серологические методы используются:
· для исследования кошек с подозрением на инфекционный перитонит
· для исследования кошек, бывших в контакте с кошками, возможно, больными инфекционным перитонитом
· по желанию заводчика кошек
· для проверки кошек, живущих в доме, на присутствие коронавируса
· для проверки кошек перед подселением к другим, свободным от коронавируса
Интерпретация результатов серологических методов может вызывать затруднения, поскольку:
· Кошки со сходными клиническими признаками могут случайно дать положительную реакцию, особенно породистые; следовательно, не смотря на то, что высокие титры антител у кошек в сочетании с клиническими признаками характерны для перитонита, это не имеет диагностического значения
· Некоторые кошки с экссудативным перитонитом имеют низкие титры антител или реагируют отрицательно, возможно, из-за огромного количества вирусных частиц в организме, в результате чего все антитела оказываются связанными и, следовательно, неспособными связаться с антигенами тест-системы
Некоторые серологические тесты определяют наличие антител, не измеряя титров (например, иммуноиммиграционный экспресс-метод, Snap), в то время как другие (Immunocomb®, иммунофлуоресцентный метод) позволяют определить титры. Результаты, выраженные в титре, удобны для мониторинга отдельных кошек или группы кошек одного владельца на предмет избавления от коронавируса.

Интерпретация результатов серологических тестов у всех кошек

Экссудативный инфекционный перитонит: хотя серологические методы используются для диагностики экссудативного инфекционного перитонита, применять их следует только в случаях, когда клинические признаки, отношение альбумин/глобулин, содержание α1-кислого гликопротеина и цитологические свойства выпота характерны для перитонита. Кошки с экссудативным перитонитом могут реагировать отрицательно, но могут и иметь антитела, в том числе в высоких титрах. Кошки с другими заболеваниями могут иногда иметь антитела к коронавирусу, особенно если в доме есть другие кошки, или если они взяты из приюта или от заводчика в последние 6–12 месяцев.

Сухой инфекционный перитонит: титры антител к коронавирусу, определенные иммунофлуоресцентным методом, обычно равны 640 или выше. Титры менее 160 почти всегда позволяют исключить сухой перитонит. Обнаружение антител у здоровой кошки принимать за раннюю стадию сухого перитонита ошибочно.

Интерпретация результатов серологических тестов у здоровых кошек

Проверка здоровых кошек, бывших в контакте с больными: здоровых кошек, контактировавших с больными инфекционным перитонитом или источниками инфекции, проверяют по одной из двух причин, описанных ниже. В любом случае нужно пояснить владельцу, что кошка с большой вероятностью окажется сероположительной. Заражаются почти все кошки, контактировавшие с источником инфекции. Это не означает плохого прогноза, так как перитонит развивается менее чем у 10% инфицированных кошек; чаще всего организм освобождается от вируса и животные начинают реагировать отрицательно.
В ситуации, когда владелец собирается завести другую кошку взамен умершей от инфекционного перитонита и хочет знать, распространяет ли вирус кошка, контактировавшая с больной:
· Если кошка, контактировавшая с больной, при серологическом исследовании реагирует отрицательно, маловероятно, что она инфицирована, и, следовательно, не распространяет вирус; заводить новую кошку безопасно
· Если кошка реагирует положительно (то есть имеет титр антител 1:10 или более), существует 1 шанс из 3, что она распространяет коронавирус, таким образом, заводить другую кошку будет неразумно (за исключением случаев, когда новая кошка имеет антитела, показывающие, что она контактировала с источником инфекции). Кошку нужно исследовать повторно спустя 3–6 месяцев, чтобы установить, снизился ли титр антител. У большинства кошек, освободившихся от вируса, антитела исчезают в период от 3 месяцев до нескольких лет. В идеале, кошек, реагирующих положительно, надо отделять от отрицательно реагирующих кошек, живущих в доме. Как только кошка начинает реагировать отрицательно, ее следует переместить в соответствующую группу во избежание реинфекции от других кошек.
Если владелец хочет знать прогноз для кошки, контактировавшей с источником инфекции:
· Если кошка реагирует отрицательно, она, вероятнее всего, не инфицирована и не заболеет инфекционным перитонитом
· Если кошка реагирует положительно, она может заболеть перитонитом, но вероятность этого мала (менее 1:10).

Проверка племенных кошек: заводчики часто просят исследовать животных перед спариванием. В этом случае:
· Кошка, реагирующая отрицательно, вероятнее всего, не инфицирована и не выделяет вирус, следовательно, может спариваться с животными, реагирующими отрицательно
· Если кошка реагирует положительно, будет разумным найти партнера, также реагирующего положительно, чтобы уменьшить риск заноса заболевания в группу, свободную от вируса. Для предотвращения инфекции котят необходимы изоляция и ранний отъем.

Проверка группы кошек на коронавирус: случайная выборка 3 или 4 кошек, живущих вместе, для исследования покажет, является ли коронавирус эндемичным, поскольку он высоко контагиозен. Дома, в которых содержится менее 10 кошек или где кошки живут изолированными друг от друга группами по 3 или менее животных, часто в конечном счете избавляются от инфекции. Исследование каждые 6–12 месяцев поможет выяснить, когда это произойдет, так как титр антител падает и больше кошек начинает реагировать отрицательно. Во избежание повторной инфекции рекомендуется отделить отрицательно реагирующих кошек от положительно реагирующих.

Проверка кошки, подселяемой к группе, свободной от коронавируса: в группы, свободные от инфекции, должны вводиться только кошки, реагирующие отрицательно. Кошек, имеющих антитела, можно изолировать и повторно исследовать через каждые 3–6 месяцев, пока результат не станет отрицательным.

Обратная ЦПР
Обратная цепная полимеразная реакция амплифицирует выбранную часть вирусной нуклеиновой кислоты до концентраций, позволяющих ее определить (см. главу 1). Метод чувствителен, но требует строгих мер предосторожности, чтобы избежать контаминации, приводящей к ложноположительным результатам. Некоторые лаборатории утверждают, что имеют тест-системы на основе обратной ЦПР для диагностики инфекционного перитонита, и могут даже предсказать вероятность развития перитонита у здоровой кошки; однако, на момент написания книги, при анализе последовательностей генов нескольких штаммов вируса инфекционного перитонита и кишечного коронавируса кошек мутация, отвечающая за вирулентность, обнаружена не была. Из-за вариабельности генома коронавируса маловероятно, что когда-либо появится тест-система, позволяющая различить вирулентные и невирулентные штаммы (Хорзинек, 1997). Для исследования можно брать фекалии, кровь, слюну или выпот, хотя мониторинг выделения вируса со слюной бесполезен, так как оно прекращается задолго до прекращения выделения с фекалиями.

Обратную ЦПР можно использовать для диагностики инфекционного перитонита:
· Присутствие коронавирусной РНК в выпоте является вероятным, но не окончательным признаком инфекционного перитонита
· Положительные результаты при исследовании крови методом ЦПР не позволяют поставить диагноз «инфекционный перитонит», так как здоровые кошки или кошки, больные другими заболеваниями, также могут реагировать положительно.
· Отрицательный результат, полученный при исследовании крови методом обратной ПЦР, не исключает возможность инфекционного перитонита, так как больные кошки могут реагировать отрицательно.

Обратная ЦПР может использоваться для мониторинга распространения вируса в доме, где проводится контроль над заболеванием. Кошек можно разделить на 3 типа:
· Большинство кошек, инфицированных коронавирусом, некоторое время распространяют вирус, имеют антитела, затем выделение прекращается и антитела пропадают; затем кошки инфицируются повторно и цикл повторяется
· Небольшая группа кошек является носителями вируса и распространяет его постоянно
· Небольшая группа кошек проявляет устойчивость к распространению вируса.

Общая патология/гистопатология
Серозные поверхности часто покрыты фибринозными наложениями, диаметром 1–2 мм (рис. 9.16). В отдельных органах могут обнаруживаться крупные гранулемы. Множественные опухоли и другие инфекции (например, туберкулез) могут протекать со сходными признаками. Печень, сальник и кишечник можно исследовать с помощью биопсии, в то время как ткани глаза и центральной нервной системы доступны только для посмертного исследования. Гистологическое исследование позволяет поставить окончательный диагноз.

Иммуногистохимия
Следующий метод диагностики в случаях, когда с помощью гистологии ясно идентифицировать инфекционный перитонит не удается